化脓隐秘杆菌感染发生在世界各地的家畜和野生动物中，大多数已报道的感染与猪、牛、羊等经济动物有关。化脓隐秘杆菌是动物皮肤、上呼吸道、泌尿生殖道黏膜生物群的一部分，同时也是一种重要的机会性病原体，通常经皮肤、黏膜破损处入侵机体，引起动物多种组织器官的化脓性或坏死性病变，如肺炎、肝脓肿、乳腺炎、心内膜炎、子宫内膜炎、流产、死胎、脑脓肿、关节脓肿、牙周炎、皮肤脓肿、浅表淋巴结脓肿等，给猪、牛、羊等产业带来较大经济损失。化脓隐秘杆菌感染常转化成慢性消耗性疾病，且多为混合感染，临床诊断困难。目前，化脓隐秘杆菌感染诊断主要依赖病原菌分离培养和核酸检测等，缺少血清学诊断方法。

溶血素(Pyolysin, PLO)是化脓隐秘杆菌各菌株均分泌的外毒素，菌株毒力与plo基因的表达水平有关，表达水平高的菌株毒力更强。PLO也是化脓隐秘杆菌的特异性保守抗原，PLO抗体水平具有反映感染所造成的组织损伤的潜力。

我院兽医兽药研究所生物药物研发创新团队使用大肠杆菌表达系统和Ni-Sepharose亲和层析制备重组PLO，采用方阵滴定法确定最佳重组PLO包被浓度及最佳二抗稀释度，建立了检测山羊化脓隐秘杆菌PLO抗体的间接 ELISA方法。该方法不与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、伪结核棒状杆菌等常见混合感染病原菌抗血清发生交叉反应，可检测出1:800稀释的阳性血清，批内和批间变异系数（CV）均 < 10 %，表现出具有良好的特异性、灵敏性、稳定性及精密性。该方法能用于大样本检测和筛查，为化脓隐秘杆菌感染的精准防控提供了准确便捷的诊断方法和技术支撑。

重组蛋白的纯度检测

M：蛋白质相对分子质量标准；1：rPLO