近年来，由奇异变形杆菌（P.mirabilis）和普通变形杆菌（P.vulgaris）引起的人和动物发病的报道逐年增多。最新的报道显示，在我国有4%的食源性公共卫生事件是由P. mirabilis和P.vulgaris引起的。同时，它们对各种动物也有较强的致病性，从九十年代开始就有关于P.mirabilis和P. vulgaris引起各种畜禽发病甚至死亡的报道。由于P.mirabilis和P. vulgaris对人和动物具有的危害性，我国在1996年由卫生部正式公布了“变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则（WS/T 9-1996）”，2010年由中国检验检疫科学研究院制定了在乳制品中检测P.mirabilis和P.vulgaris的方法（SN/T 2552.8-2010），2011年由中华人民共和国天津出入境检验检疫局制定了从蝇类、蜚蠊中检测P.mirabilis和P. vulgaris的方法（SN/T 3064.5-2011）。这些标准的公布与实行，对食品安全和公共卫生有着十分重要的作用。但在这些标准中所采用的检测方法为生化鉴定和16SrRNA测序，在实际操作中费时费力。目前，荧光定量PCR技术已经在微生物的检测广泛的应用，其灵敏性、可靠性和简便性已经得到证实。因此建立一种可以快速、准确的检测和区分P. mirabilis和P. vulgaris的荧光定量PCR标准方法，对于疾病的诊断、食品安全和公共卫生有着十分重要的意义。

为解决P.mirabilis和P.vulgaris难以快速检测和区分的问题，我院兽医兽药研究所建立了P. mirabilis和P. vulgaris的Real-Time PCR检测方法。该方法采用了双重TaqMan Real-Time PCR技术，针对P.mirabilis和P.vulgaris的目标基因设计了4条特异性引物和2条带有不同荧光基团的特异性探针，在FAM通道检测P.mirabilis，在HEX通道检测P.mirabilis，在菌液中对P.mirabilis和P.vulgaris的检测极限为：6.08×102 CFU/mL和4.46×102 CFU/mL，使得P.mirabilis和P.vulgaris的检测和区分可以同时进行，是一个特异性强、灵敏性高、方便实用的技术。且该检测方法在2022年12月获重庆市地方标准批准发布，编号DB50/T 1298-2022，该标准的发布为P.mirabilis和P.vulgaris的快速检测和区分提供了技术支持，有重要的公共卫生意义。

图 P.mirabilis和P.vulgaris的灵敏度检测结果

FAM通道用于检测P.mirabilis，“S”型扩增曲线从左到右浓度为6.08 × 107 ~ 6.08 × 102 CFU/mL；Hex通道用于检测P.vulgaris，S”型扩增曲线从左到右浓度为4.46 × 107 ~ 4.46×102 CFU/mL